還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細(xì)胞檢測和定位對于了解氧化還原態(tài)的調(diào)節(jié)、藥物的作用效應(yīng)以及脫毒機(jī)制方面十分重要。有文獻(xiàn)報(bào)道不同細(xì)胞亞群在應(yīng)對氧化應(yīng)激時(shí)的GSH水平存在差異,因此,適用于流式細(xì)胞分析和自動(dòng)化熒光檢測的GSH檢測探針的開發(fā)非常重要。比較于常用的GSH檢測探針:單溴二胺(mBBr,MX5315)、單氯二胺(mBCl,MX5318),以及Thiotracker™ Violet,ThiolTrace™ Violet 500是一款更明亮和更穩(wěn)定的細(xì)胞內(nèi)硫醇探針(Thiol probe),用于監(jiān)測胞內(nèi)硫醇。由于GSH代表細(xì)胞內(nèi)的絕大多數(shù)游離硫醇,因此,ThiolTrace™ Violet 500能用來評(píng)估細(xì)胞內(nèi)GSH的水平。
優(yōu)勢:
1、比mBCl和其他常用的胞內(nèi)硫醇染料(比如:Thiotracker Violet)至少明亮10×;在含生長因子的細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi),ThiolTrace Violet 500比Thiotracker Violet的熒光強(qiáng)度高10-100倍(見附圖I)。
2、能用紫外(UV)或405nm波長激發(fā),最大發(fā)射波長~525nm(見附圖II)。
3、能用醛類固定和0.5% Triton X-100透化。
4、能用于多通路分析,包括細(xì)胞毒性研究。
5、兼容于各種稀釋溶液包括含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基。
6、操作簡單,只需37℃孵育30min即可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi);
7、適用于多種檢測方法,包括:流式細(xì)胞術(shù)、HCS成像和落射熒光顯微鏡。

